Преференцијална дијагностика

Тхе Преференцијална дијагностика нуди могућност генетског испитивања женских јајних ћелија као део ин витро оплодње (ИВФ). Прегледи се врше на хромозомима првог и другог поларног тела, који настају током 1. и 2. мејозе након уношења мушке сперме у јајну ћелију. Предност ове методе је у томе што се не ради о пре-имплантацијској дијагнози (ПГД), јер се испитивање врши пре спајања женског и мушког језгра, тако да је дијагноза фаворитизације дозвољена у неким земљама у којима је ПГД забрањен.

Шта је дијагностика преферирања?

Дијагностика преферирања омогућава идентификацију хромозомске аберације у хаплоидном геному женске јајне ћелије у контексту ин витро оплодње (ИВФ). Пре свега, могу се открити нумеричка одступања одређених хромозома (анеуплоидија) и абнормалности одређених гена који узрокују наследне болести. Када се мушки сперматозоид уведе у цитоплазму јајне ћелије током ИВФ-а, покреће се прва и друга мејоза (мејоза И и ИИ) јајета.

Подела ствара две "сувишне" ћелије, поларна тела, која имају исти скуп хромозома као и сама јајна ћелија. Поларна тела, која би тело нормално разграђивало, уклањају се поларном биопсијом за преглед хромозома. Пошто се дијагноза префетилизације увек поставља на поларним телима, поступак се назива и дијагноза поларног тела (ПКД). Предност методе испитивања је у томе што се може извести и у неким земљама где је забрањена пре-имплантациона дијагноза (ПГД), јер се испитивање врши на геному јајне ћелије када се ћелијске језгре сперматозоида и јајне ћелије још нису спојиле.

Недостатак је тај што се могу прегледати само хромозомске аберације мајчиног генома. Хромозоми сперме који су унесени у цитоплазму јајета не могу се открити овом методом. Болести повезане са И не могу се препознати јер скуп хаплоидних хромозома јајне ћелије не може садржавати И-хромосом.

Функција, ефекат и циљеви

Као део дијагнозе пре оплодње у облику испитивања генетског поларног тела, нумеричке аномалије (анеуплоидија) могу се открити у одређеним хромозомима материнског генома, као и транслокације у којима су сегменти хромозома одвојени и реинтегрисани на погрешном месту. Поред тога, могу се дијагностицирати мутације гена повезаних са Кс које се наслеђују од мајке и засноване су на мутацији једног гена (моногенска болест). Ово претпоставља да мора бити позната потенцијална наследна болест како би се могао посебно испитивати одређени ген на Кс хромозому.

У случају рецесивног наследства, постоји шанса да Кс хромозом полног тела - а самим тим и Кс хромозом оплођене јајне ћелије, садржи здрави алел одговарајућег гена. Сам поступак укључује биопсију поларног тела у којој се два хаплоидна поларна тела уклањају из јајне ћелије, а хромозоми се затим подвргавају ФИСХ тесту (флуоресценција ин ситу хибридизација). Биопсија поларних тела представља огроман изазов за лабораторију која изводи радове, јер за идентификацију и изолацију поларних тела је потребно одређено искуство. За поступак ФИСХ теста доступне су такозване ДНК пробе за одабране хромозоме, који се повезују на одговарајуће хаплоидне хромозоме јер имају комплементарни низ аминокиселина.

ДНК сонде су обележене различитим флуоресцентним бојама, тако да се хромозоми могу препознати уз помоћ посебног софтвера и рачунати у аутоматском процесу. Већина хромосомских аберација, попут анеуплоидија и померања хромозома унутар хромозома, су фаталне. То значи да ИВФ или не формира зиготу, или да се ембрион одбацује након трансплантације у материцу, или да долази до раног или каснијег побачаја. Будући да се учесталост кромосомских аберација у јајним ћелијама жена повећава с годинама, важан циљ дијагностике преферирања је позитиван избор оплођених јајашаца. Само оплођена јајашца са нетакнутим геномом - ако су препознатљива - трансплантирају се назад у материцу.

Каже се да позитивна селекција повећава стопу трудноће након ИВФ-а и смањује број одбачених оплођених јајашаца и број побачаја. Други циљ је искључење наследних болести заснованих на аберацијама хромозома или одређеним генетским оштећењима у пресађеном оплођеном оплођеном јајету од самог почетка позитивном селекцијом оплођених јајашаца. Типичне наследне болести које се могу искључити тестом су цистична фиброза, атрофија мишића кичме и анемија српастих ћелија.

Ризици, нуспојаве и опасности

Дијагностика преферирања се врши ван тела и зато не укључује никакве додатне физичке ризике за дотичну жену. Постоји само мали ризик од физичких повреда и инфекција повезаних са уклањањем јаја. За разлику од ПГД-а, који такође укључује преглед хромозома коришћењем ФИСХ теста, дијагноза пре оплодње може само мајку прегледати хромозом и генетски материјал.

То значи да негативан ФИСХ тест, у коме нису дијагностиковане кромосомске или генетске аберације, може побудити претјерано позитивна очекивања родитеља у погледу трудноће и накнадног порођаја. Хромосомске аберације генома оца и евентуално постојеће аномалије И хромозома, које би могле изазвати полно-наследну болест, нису забележене. У том погледу, дијагноза пре оплодње је још непотпунија од ПГД-а у којој се може прегледати целокупни геном ембрија у фази бластуле.

Међутим, чак и са негативним ПГД-ом, не може се искључити да постоје генске оштећења у геному ембриона која могу узроковати нежељени развој и евентуална оштећења након рођења. ФИСХ тест може се икада односити само на одабране хромозоме и гене.